酵母互補實驗的快速檢測方法

 酵母，一種體內模式生物，具有很大的優(yōu)勢。釀酒酵母，芽殖酵母，是一種單細胞真核生物。大多數進程，例如轉錄，翻譯，蛋白質折疊都是保守的，因此酵母是一種非常合適的復雜哺乳動物細胞的替代品。

與其他模式生物不同，例如大腸桿菌，酵母沒有毒性，而且能表達完整的膜蛋白。

1996年對酵母基因組進行測序后，出現(xiàn)了許多用于基因操作的工具。發(fā)明了例如穿梭載體，通過同源重組刪除基因?？梢允褂镁哂腥笔Ь甑拇笮臀膸?，輕松設置功能分析。

酵母互補試驗，缺失某種蛋白質的酵母突變體，通過轉基因將一個外顯子基因質粒轉入突變體。此時，這株酵母突變體面對一種境況，就是這種缺失掉的蛋白質功能會影響它的存活和生長。如果這種缺失型突變體生長出來了，就意味著這種轉入的外顯子基因補償了這種缺失基因的功能，使得酵母細胞能夠正常存活和生長。有一些方法可以檢測酵母的互補試驗，比如液體測量，尿素測量法，氨測量法，水份測量法等。在此，我們介紹一種方法：計數酵母的方法。

CellDrop 明場計數酵母細胞：采用*的小細胞模式，結合AI算法，準確計算酵母細胞總數。

不僅如此，采用熒光染料FDA+PI的組合，可以進行酵母細胞的活力檢測

 活性檢測：

     活性檢測即用兩種不同的熒光試劑進行染色。Y20.1細胞，過夜誘導，在明場計數儀下計數5e6 cells/ml. 針對CellDrop 酵母活性分析（DeNovix）18ul的細胞懸浮液和1ul的FDA和PI?；旌衔锉芄庀?/span>15min。10ul的混合物側面peptide入到celldrop中，進入yeast app進行測量。

   活力檢測中，應用熒光試劑判斷酵母細胞的死活，將檢測時間從5天的尿素檢測或氨檢測時間縮短到了十幾秒。

    無需一次性或可重復利用的計數板，CellDrop BF/FL做到絕對的無耗材，是新一代計數儀的代表。